FMDV2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达

• 作者: 宋宇轩 崔易虹 曹斌云 朱广琴 杨明明 王韵斐 陈秋菊
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 人白细胞介素2 EGFP FMDV 2A 双顺反子
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1396-1401
• 分类号: S852.659.6|Q784
• 字数: 4542字
• 语种: 中文

摘要

构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因(hIL-2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子乳腺特异性表达载体,并验证其在乳腺上皮细胞中的表达.克隆奶山羊β-酪蛋白启动子序列,将hIL-2基因序列置于启动子之后,然后利用口蹄疫病毒2A(FMDV 2A)自剪切序列连接EGFP基因,构建出乳腺特异性的双顺反子表达载体pFIENβ,并利用脂质体转染山羊乳腺上皮细胞,然后用RT-PCR技术和Western blot检测hIL-2基因与EGFP基因的表达.重组质粒pFIENβ经酶切鉴定后表明构建成功,转染质粒PFIENβ和pEGFP-C1的细胞均观察到绿色荧光；从转染pFIENβ的乳腺上皮细胞中扩增出hIL-2基因和EGFP基因,而转染pEGFP-C1的细胞中只扩增出EGFP基因；经Western blot检测,转染pFIENβ的细胞中均表达了hIL-2和EGFP蛋白.结果表明山羊β-酪蛋白启动子能同时启动hIL-2基因和EGFP基因在山羊乳腺上皮细胞中的表达,并且利用FMDV 2A元件实现了hIL-2基因和EGFP基因的非融合型表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹斌云	西北农林科技大学动物科技学院	111	665	14.0	19.0
2	宋宇轩	西北农林科技大学动物科技学院	61	385	12.0	17.0
3	朱广琴	西北农林科技大学动物科技学院	14	80	5.0	8.0
4	杨明明	西北农林科技大学动物科技学院	47	174	8.0	10.0
5	崔易虹	西北农林科技大学动物科技学院	8	15	3.0	3.0
6	陈秋菊	西北农林科技大学动物科技学院	5	6	1.0	2.0
7	王韵斐	西北农林科技大学动物科技学院	4	6	1.0	2.0