大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化和鉴定

• 作者: 张利 张雪梅 王朝晖 纪军 陈海龙
• 来源期刊: 中国中西医结合外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 肺表面活性物质相关蛋白A 细胞培养
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 489-491
• 分类号: Q95-33|R655.3
• 字数: 2627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6948.2011.05.013

摘要

目的:探讨大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分离、培养及鉴定的方法.方法:采用Dobbs法提取ATⅡ.肺动脉灌洗减少肺内红细胞,气管灌洗除去肺泡腔内的白细胞,将胰蛋白酶、胶原酶灌入肺内消化分离细胞;采用免疫贴附法纯化细胞,将细胞悬液培养于覆被IgG的平皿中,有Fc段受体的细胞被黏附,而无Fc段受体的ATⅡ得以纯化.ATⅡ的鉴定采用电镜和肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫组化染色,其在电镜下有特征性板层小体,免疫组化染色见胞浆有SP-A表达.结果:纯化后台盼蓝染色显示细胞活力为95%以上.通过SP-A免疫组化染色判定,纯化后ATⅡ纯度可达92%.结论:分离、纯化大鼠ATⅡ时,合适的胰蛋白酶浓度及作用时间对细胞活性有重要作用,大鼠IgG黏附纯化可以得到高纯度的ATⅡ,通过电子镜观察板层小体和免疫组化染色检测细胞SP-A表达可用于鉴定ATⅡ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈海龙	大连医科大学附属第一医院普外科	103	896	17.0	25.0
2	张利		19	114	6.0	10.0
3	纪军		17	70	5.0	8.0
4	王朝晖		21	74	6.0	7.0
5	张雪梅	解放军210医院普外科	13	41	3.0	5.0