毛白杨labA-1ikel基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建

• 作者: 刘军梅 叶梅霞 安新民 崔东清 张志毅 李昊
• 来源期刊: 北京林业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 毛白杨 labA—like 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 林学
• 页码范围: 55-62
• 分类号: S718.46
• 语种: 中文

摘要

利用滤纸吸附噬菌体一PCR法，从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-1ikel基因cDNA全长序列。在Conserved Domains Database（CDD）中对该基因氨基酸保守结构域进行分析，发现其包含一个LabA—like superfamily结构域，故将其命名为PtlabA—likel。经BLAST分析，在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3．1软件，绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT—PCR分析，揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式：PtlabA—likel、PtlabA—like6呈现相似的组织表达模式，在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达，但PtlabA—likel表达丰度较高；PtlabA—like8只在根部表达，且表达丰度较低；其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达，但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能，构建了该基因的正义表达载体。