牛附红细胞体单管套式PCR检测方法的建立

• 作者: 张守发 薛书江 贾立军 邢莹 郑秀红
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 牛附红细胞体 16S rRNA 单管套式PCR
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 15-18
• 分类号: S858.23
• 字数: 2620字
• 语种: 中文

摘要

为快速、准确地检测出牛附红细胞体,根据GenBank上发表的牛温氏附红细胞体(Mycoplasma wenyonii) 16S rRNA基因序列(登录号AF016546)设计合成内外2对引物,建立了牛附红细胞体单管套式PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性及应用试验.结果:建立的牛附红细胞体单管套式PCR检测方法扩增的片段大小为361 bp,与GenBank中相应序列同源性为98%,该方法扩增不出牛瑟氏泰勒虫、新抱子虫、布氏杆菌及牛无乳链球菌等基因片段,检测出标准模板DNA的最小量为1.22娜WL.通过对吉林省延边地区66份血液样本的临床检测显示,单管套式PCR检出率28.8%,高于常规PCR的21.2%和鲜血压片镜检的12.1%,具有准确、特异、敏感等优点,是检测牛附红细胞体的一种新型、可靠的诊断技术.