小鼠胚胎神经干细胞的体外培养与鉴定

• 作者: 刘勇 吕海侠 张蓬勃 李卫松 李玲 王妮 陈新林 雷珊 高明
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 胚胎 细胞培养 小鼠
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 244-247
• 分类号: R-33
• 语种: 中文

摘要

目的:通过改进和优化神经干细胞(NSCs)的体外培养方法,为进一步研究NSCs的生物学行为提供基础.方法:孕14 d的美国癌症研究所(ICR)plx鼠,无菌条件下剪取前脑皮质,采用机械法分离原代细胞进行培养,采用机械法复合酶消化法对原代细胞进行传代和培养.以1%胎牛血清诱导分化,应用免疫荧光方法行巢蛋白(nestin),β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色.对培养的细胞进行鉴定.结果:从胚胎小鼠前脑皮质中分离得到的细胞具有连续传代形成克隆球的能力,克隆球呈nestin免疫反应阳性;加入胎牛血清可诱导分化为β-mbulinⅢ和GFAP阳性细胞.结论:机械法分离胚胎小鼠前脑皮质细胞,机械法复合酶消化法对原代细胞进行传代和培养,能够成功获得胚胎小鼠前脑的NSCs.