脂质体介导法转染mIMCD-3细胞的可行性及最佳转染条件

• 作者: 史书龙 张旭 马跃荣 高岑
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脂质体 mIMCD-3细胞 细胞转染 转染效率 组织工程
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2739-2742
• 分类号: R318
• 字数: 4611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.15.019

摘要

背景:近年来阳离子脂质体成为基因转移较为常用的载体,但应用脂质体对mIMCD-3细胞株进行转染的相关报道较少.目的:探讨脂质体法转染mIMCD-3细胞株的可行性,并通过优化脂质体转染效率的影响因素,获得mIMCD-3的最佳转染条件.方法:以绿色荧光蛋白作为报告基因,采用脂质体LipofectamineTM 2000包裹pIRES2-EGFP质粒转染mIMCD-3细胞,分别按照细胞接种密度、DNA用量、DNA与脂质体的比例、不同的质粒抽提方法、血清有无设定分组,观察以上因素对mIMCD-3细胞转染效率的影响.结果与结论:采用脂质体LipofectamineTM 2000转染mIMCD-3细胞,在2×108 L-1细胞接种浓度、1 μg DNA用量、1∶3的DNA与脂质体比例时,转染效率最高.采用美国OMEGA公司生产的E.Z.N.A.Endo-Free Plasmid Mini Kit抽提的质粒能获得更高的转染效率.转染前漂洗细胞后换入无血清培养基比有血清组转染效率高(P < 0.01),而转染后6 h加入血清不影响转染效率.结果显示,脂质体法转染mIMCD-3细胞株是可行的,通过优化脂质体转染效率的影响因素,获得了mIMCD-3的最佳转染条件,可作为有关研究或应用的参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马跃荣	泸州医学院病理教研室	43	175	8.0	11.0
2	张旭	泸州医学院病理教研室	27	91	6.0	8.0
3	史书龙	泸州医学院病理教研室	13	84	5.0	9.0
4	高岑	泸州医学院病理教研室	13	19	2.0	3.0