猪肺炎支原体P36基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: 冯志新 刘茂军 周斌 曹瑞兵 祝永琴 邵国青 陈溥言 魏建超
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 P36基因 毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 307-312
• 分类号: S858.28
• 字数: 4198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.02.013

摘要

根据GenBank中猪肺炎支原体P36基因序列设计1对特异性引物,通过PCR扩增出猪肺炎支原体特异性蛋白基冈P36,克隆入酵母表达载体pPICZα-A,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-P36.PICZα-A-P36经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33.PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌P36蛋白于发酵卜清液中,通过SDS-PAGE电泳以及Western-blotting进行鉴定,结果表明,P36蛋白基因获得了分泌性表达,而且具有良好的反应原性,这为猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了基础.