小叶锦鸡儿SSR-PCR体系优化及应用

• 作者: 王赞 韩永增 高洪文
• 来源期刊: 草业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小叶锦鸡儿 SSR-PCR体系优化
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 植物生产层
• 页码范围: 399-403
• 分类号: S541
• 字数: 2889字
• 语种: 中文

摘要

为建立适宜小叶锦鸡儿(Caragana microphylla)SSR-PCR的反应体系,利用正交试验设计L16(45),对模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和Taq DNA聚合酶的浓度进行五因素四水平优化筛选,确立最佳反应体系和扩增程序.即在25μL反应体系中包括:40 ng模板DNA,3 mmol/L Mg2+,300 μmol/L dNTP,0.6 μmol/L引物,1 UTaq DNA聚合酶,1×Buffer.扩增反应程序为:94℃ 10 min;94℃ 45 s,65℃ 1 min,72℃ 1 min,10个循环,每循环的复性温度递减1℃;94℃ 45 s,55℃ 1 min,72℃ 1 min,30个循环:72℃ 10 min,4℃保存.应用该优化体系对小叶锦鸡儿种质资源及不同引物进行了检验及筛选.本研究表明,该体系的建立为今后利用SSR标记对小叶锦鸡儿属遗传多样性研究、遗传图谱构建及种质资源鉴定等研究工作提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王赞	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	62	994	17.0	28.0
2	高洪文	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	107	2252	23.0	42.0
3	韩永增	兰州大学草地农业科技学院	3	31	3.0	3.0