鸡胚盲肠上皮细胞的传代培养

• 作者: 侯金环 古少鹏 王运盛 赵素芬 郑明学
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 盲肠上皮细胞 传代培养 特性 鸡胚
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 409-415
• 分类号: S852.1
• 字数: 5550字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在探讨鸡胚盲肠上皮细胞传代培养条件及其特性,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型.分别用胰酶-EDTA联合消化和分步消化2种方法分离纯化原代鸡胚盲肠上皮细胞,通过测定贴壁细胞覆盖率选择细胞传代的适宜消化方式;筛选了传代细胞培养液中L-GLN和胰岛素的最佳浓度,通过贴壁差进一步纯化盲肠上皮细胞,探索其合适的培养条件.通过形态学观察、透射电镜、免疫组织化学技术、组织化学技术、糖原染色、流式细胞术的方法对传代细胞特性进行了鉴定.结果表明:胰酶-EDTA联合消化、15 min贴壁差纯化除去成纤维细胞,72.5 mg·L-1L-GLN、0.05 mg·L-1胰岛素和5%FBS的传代细胞培养液更有利于盲肠上皮细胞的生长;经形态学和透射电镜观察,AKP、Vimentin及PAS染色,所培养的传代细胞具有典型的上皮细胞特征,在传代后24～72 h盲肠上皮细胞纯度达95%以上,贴壁细胞覆盖率达85%以上;细胞凋亡测定表明,细胞连传5代,活性较好,第6代细胞凋亡率显著增加,贴壁细胞覆盖率降低.本研究提示用该法传代可获得稳定、数量大、活性高、纯度高的鸡胚盲肠上皮细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	古少鹏	山西农业大学动物科技学院	80	477	11.0	18.0
2	郑明学	山西农业大学动物科技学院	132	939	17.0	25.0
3	侯金环	山西农业大学动物科技学院	5	22	3.0	4.0
4	赵素芬	山西农业大学动物科技学院	5	29	3.0	5.0
5	王运盛	山西农业大学动物科技学院	3	13	2.0	3.0