高通量生物反应器Tubespin培养CHO细胞条件的优化

• 作者: 熊盛 王一婷 谢奎 雷云 黄鹂
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Tubespin CHO细胞 细胞培养技术 氯化钠 细胞密度 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 715-719
• 分类号: R392.33
• 语种: 中文

摘要

目的 优化高通量生物反应器Tubespin培养CHO细胞的条件,提高蛋白表达量.方法 采用Tubespin生物反应器在不同转速(160、180和200 r/min)和培养体积(5、10、20和35 ml)条件下振荡悬浮培养CHO细胞,测定不同条件下的气体交换速率、细胞密度、细胞活力及蛋白相对表达量,优化细胞培养条件.在最佳培养条件下,向培养基中分别添加30、60和90 mmol/L氯化钠,观察不同浓度氯化钠对细胞密度、细胞活力、摄氧率、溶氧及重组蛋白表达的影响.结果 Tubespin具有良好的气体交换速率,可满足高密度细胞培养的需要;经优化,细胞培养最佳条件为:摇床转速180 r/min,培养体积10 ml,此时细胞生长密度高,较快进入稳定期进行重组蛋白的表达.细胞培养72 h时向培养基中添加60 mmol/L氯化钠,能使重组蛋白的表达量提高1倍.结论 优化了Tubespin培养CHO细胞的条件和氯化钠诱导浓度,提高了重组蛋白的产量,为大规模发酵生产奠定了基础.