siRNA对HeLa细胞膀胱癌相关蛋白基因表达的抑制作用

• 作者: 伍欣星 左泽华 张力 赵旻
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 siRNA BLCAP基因
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 709-712,732
• 分类号: R730-5
• 语种: 中文

摘要

目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)基因高效真核siRNA载体，转染人宫颈癌细胞系HeLa，构建BLCAP基因沉默细胞系，以观察靶向siRNA对BLCAP基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条，分别命名为pRNA-U6.1-B1，B2，B3-siRNA，重组体经脂质体转染细胞，通过荧光显微镜观察细胞内质粒表达情况，并采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后BLCAP基因mRNA及蛋白的表达，验证RNAi作用的特异性及时效性。结果:同对照组相比，各BLCAP siRNA均可引起靶基因表达水平的显著性下降(P＜0.05),尤以pRNA-U6.1-B2-siRNA的作用效果最强(P＜0.01)；而空脂质体组及阴性对照siRNA组的靶基因表达水平则无明显变化。将pRNA-U6. 1-B2-siRNA转染细胞后12，24，48 h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P＜0.05),其中在24 h后达到最强抑制效果。结论:不同序列的siRNA，对靶基因的干扰效率不同；BLCAP基因siRNA能够特异、高效性的抑制靶基因的表达；抑制作用在24 h达到高峰，并可维持到转染后48 h。试验结果为进一步研究采用RNA干扰技术进行宫颈癌的生物治疗奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	伍欣星	武汉大学医学院病毒学研究所	51	117	6.0	7.0
2	赵旻	武汉大学医学院病毒学研究所	39	136	5.0	9.0
3	张力	武汉大学医学院病毒学研究所	51	228	8.0	14.0
4	左泽华	武汉大学医学院病毒学研究所	10	24	3.0	3.0