创伤弧菌溶细胞素融合蛋白诱导人Jurkat-T淋巴细胞凋亡的研究

• 作者: 姚蔚 楼永良 谢旦立 郭雅君
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 创伤弧菌溶细胞素 人Jurkat T淋巴细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 332-336
• 分类号: R446
• 字数: 4432字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2011.04.007

摘要

目的:探讨创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)对人Jurkat T淋巴细胞凋亡的作用及凋亡过程中Caspase-3酶活性的变化.方法:利用基因工程方法体外表达、制备和纯化rVvhA;MTT法检测rVvhA 对Jurkat T淋巴细胞的细胞毒活性影响;Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测rVvhA诱导Jurkat T淋巴细胞凋亡情况;Hochest33258荧光染色激光共聚焦显微镜观察rVvhA诱导Jurkat T细胞核形态的改变;分光光度法检测凋亡过程中Caspase- 3酶活性的变化.结果:纯化复性后rVvhA的纯度达到92%以上;MTT结果显示rVvhA活性蛋白能显著抑制Jurkat T淋巴细胞的生长,有效浓度为1.5 HU/mL;流式细胞仪和激光共聚焦检测发现rVvhA作用后Jurkat T淋巴细胞核固缩,产生亮蓝荧光,1.5 HU/mL rVvhA,作用4 h后即可有效诱导其凋亡,凋亡率为(39.13±3.33)%,对照组为(3.43±0.34)%,且能被Caspase全酶抑制剂一定程度抑制.1.5 HU/mL rVvhA作用Jurkat T淋巴细胞3 h,Caspase-3酶活性达到高峰.结论:rVvhA能损伤人Jurkat T淋巴细胞,诱导其发生细胞凋亡,Caspase-3可能在rVvhA诱导的Jurkat T细胞凋亡过程中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楼永良	温州医学院检验医学院	57	229	8.0	12.0
2	姚蔚	温州医学院检验医学院	16	37	4.0	5.0
3	谢旦立	温州医学院检验医学院	5	10	2.0	3.0
4	郭雅君	温州医学院检验医学院	2	4	1.0	2.0