小鼠beta-防御素2真核表达载体的构建及表达

• 作者: 李明远 温浩 蒋中华 金一帮 魏晓丽
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: beta-防御素2 真核表达 逆转录聚合酶链反应 蛋白免疫印迹
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 98-101
• 分类号: Q78
• 字数: 3133字
• 语种: 中文

摘要

构建小鼠heta-防御素2(murie beta-defensin 2,mBD2)的真核表达载体pcDNA-mBD2,并观察其在真核细胞中的表达.从小鼠肝组织中提取mRNA通过逆转录聚合酶链反应扩增得到mBD2基因,定向克隆至真核表达栽体pcDNA3.1(+)获得pcDNA-mBD2;经酶切和测序鉴定构建正确,应用脂质体法转染siha细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内mBD2的表达.结果显示,构建了小鼠mBD2的真核表达载体,转染siha细胞培养并采用G418稳定筛选后,获得稳定转染细胞,收集并裂解转染细胞,蛋白免疫印迹法检测到转染细胞内mBD2的表达.成功构建了真核表达裁体pcDNA-mBD2,为研究mBD2在宫颈癌发生发展过程中的作用及作用机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温浩	新疆医科大学包虫病重点实验室	312	1990	21.0	28.0
2	金一帮	新疆医科大学包虫病重点实验室	3	5	1.0	2.0