草鱼呼肠孤病毒TaqMan real-time PCR检测方法的建立

• 作者: 周勇 徐进 曾令兵 罗晓松 肖艺 范玉顶 马杰
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼呼肠孤病毒 VP6蛋白编码基因 TaqMan real-time PCR 检测
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 页码范围: 774-779
• 分类号: S941.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2011.17358

摘要

利用RT-PCR技术扩增出草鱼呼肠孤病毒(GCRV)VP6蛋白编码区长度为1 250 bp的片段,克隆到pEGFP-Nl载体上,构建重组质粒pEGFP-N1-VP6.经PCR鉴定确认正确后,以10倍梯度稀释pEGFP-N1-VP6重组质粒,作为标准模板进行TaqMan real-time PCR扩增,制作标准曲线,建立了草鱼呼肠孤病毒的荧光定量PCR检测方法.检测结果显示,标准曲线的相关系数(R2)达到0.998 09,斜率为-3.373;对初始模板定量检测的范围为1×101～1×106copies/μL;特异性试验结果表明,该方法可特异性地检测出草鱼呼肠孤病毒,而对鲤春病毒血症病毒(SVCV)、传染性造血器官坏死症病毒(IHNV)无检测信号.本研究建立的草鱼呼肠孤病毒TaqMan real-time PCR方法灵敏度高、特异性强,可进行定量分析,对草鱼出血病快速诊断与病毒病原定量检测有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐进	中国水产科学研究院长江水产研究所	36	359	11.0	17.0
2	范玉顶	中国水产科学研究院长江水产研究所	30	231	10.0	14.0
3	曾令兵	中国水产科学研究院长江水产研究所	56	582	14.0	22.0
5	罗晓松	中国水产科学研究院长江水产研究所	20	268	10.0	16.0
6	周勇	中国水产科学研究院长江水产研究所	36	264	9.0	15.0
9	马杰	华中农业大学水产学院	1	28	1.0	1.0