利用抑制消减杂交技术筛选鹅就巢行为相关基因

• 作者: 李慧芳 汤青萍 章双杰 苏建东 邹剑敏 郭军 陆火林 陈宽维 马月辉
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅 就巢行为 卵巢 抑制消减杂交技术 表达序列标签
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1477-1484
• 分类号: S835|S814.8
• 字数: 4107字
• 语种: 中文

摘要

旨在利用抑制消减杂交技术构建鹅就巢与产蛋cDNA基因文库,筛选就巢母鹅上调与下调表达的基因.以就巢期和产蛋期鹅卵巢组织互为检测子和驱动子,进行正反双向消减杂交,获得鹅卵巢差异表达基因文库.从双向文库随机挑选单菌落进行PCR验证,结果表明文库质量良好.选取654个阳性克隆进行测序分析,获得641条表达序列标签(ESTs).对ESTs进行去除载体序列、质量检测、聚类及拼接,经BLASTn比对,有166条ESTs找到与之匹配的同源序列,其中92个是功能基因.比较就巢与产蛋SSH文库,发现就巢SSH库中参与细胞凋亡、信号转导及细胞结构的基因出现频率较高；产蛋特异性基因文库中参与物质能量代谢、细胞防御的基因较多；尚有许多差异片段属于未知功能蛋白或理论推定蛋白.结果提示,催乳素受体、抗苗勒管激素以及雌激素受体基因在就巢期上调表达可能与鹅就巢行为的启动与维持有关.该结果为进一步研究鹅就巢行为分子调控机制奠定基础.