多重连接依赖的探针扩增技术在Dystrophin 基因外显子拷贝数异常临床检测中的研究

• 作者: 刘晓青 孙维 季星 李西华 蒋雯婷 陶炯 龙飞
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: Duchenne/Becker肌营养不良 多重连接依赖的探针扩增技术 Dystrophin基因
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 临床遗传学论著
• 页码范围: 699-704
• 页数: 6页
• 字数: 4729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2011.06.023

摘要

目的 阐明多重连接依赖的探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)在Dystrophin基因外显子拷贝数异常检测中的优势和局限,探讨MLPA单外显子异常结果的处理方法.方法 应用MLPA对70例确诊的Duchenne/Becker肌营养不良(Duchenne/Becker musculardystrophy,DMD/BMD)患者进行Dystrophin基因外显子缺失及扩增的检测.对于单外显子异常结果通过PCR、测序和荧光定量PCR进行进一步验证.结果 在70例样本中,MLPA检出外显子缺失42例(60％),其中12例为单一外显子缺失,1例为单一外显子可疑缺失；检出外显子扩增7例(10％),其中2例为单一外显子扩增；21例样本未检出外显子拷贝数异常(30％).在12例MLPA提示的单一外显子缺失中,11例PCR验证结果与MLPA一致,1例为微缺失突变(c.4470-4471delAA)；在1例MLPA提示单外显子疑似缺失,经测序确定为既往未报道的微缺失突变(c.4746-4747delCT)；在2例MLPA提示单一外显子扩增的样本荧光定量PCR结果与MLPA一致.结论 MLPA技术应成为Dystrophin基因外显子拷贝数异常的首选检测方法;MLPA提示的单外显子异常结果必须结合其他检测方法进行进一步验证.