复制型HBV-Tg小鼠原代肝细胞的培养

• 作者: 刘振扬 孔祥平 张欣蕊 易学瑞 袁有成 陶鑫
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 活性氧簇 酒精 细胞模型 原代肝细胞
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 97-100
• 分类号: R329.2
• 字数: 3433字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立复制型HBV-Tg原代肝细胞体外培养方法,观察HBV-Tg小鼠原代肝细胞的氧化应激敏感性.方法 改良的两步灌注法分离、纯化、培养HBV-Tg小鼠原代肝细胞,24孔板培养7天,每天换液,收集上清,检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙氨酸转移酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转移酶(aspartate transaminase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)和病毒学指标HBsAg、HBV-DNA的水平;分离HBV-Tg小鼠与野生型Balb/c鼠肝细胞,培养24h后加不同浓度酒精,于16h后检测两种小鼠原代肝细胞培养上清的AST水平.结果 HBV-Tg小鼠原代肝细胞从铺板第3天开始,LDH、ALT、AST水平达到平衡,膜稳定性恢复正常;在第3～5天ALB水平稳定于较高水平;HBV复制及表达指标(HBsAg、HBV-DNA)在铺板后1～5天能保持较高水平;酒精对原代肝细胞的氧化应激损伤,浓度<2%时,野生型Balb/c鼠肝细胞损伤程度明显低于HBV-Tg小鼠,浓度≥2%时,两种鼠肝细胞的损伤程度相当.结论 复制型HBV-Tg小鼠原代肝细胞培养可以在体外稳定维持肝细胞活性与功能,表达高水平的HBV-DNA和HBsAg,为体外研究乙型肝炎病毒发病机制提供新的模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易学瑞	解放军458医院全军肝病中心	5	13	2.0	3.0
2	袁有成	解放军458医院全军肝病中心	3	5	2.0	2.0
3	孔祥平	解放军458医院全军肝病中心	17	84	5.0	8.0
4	刘振扬	解放军458医院全军肝病中心	2	5	2.0	2.0
5	陶鑫	解放军458医院全军肝病中心	2	5	2.0	2.0
6	张欣蕊	解放军458医院全军肝病中心	1	3	1.0	1.0