重组复杂蛋白快速表达体系的建立

• 作者: 何太平 唐菁燕 宋春雷 徐珑 杨波 聂艳桃 谭晓晶 雷韬
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组蛋白 CHO细胞 定点整合 快速表达
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1259-1263
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 建立重组复杂蛋白快速表达体系.方法 利用定点整合技术建立定点整合宿主细胞库,分别以X-Fc融合蛋白和人凝血因子Ⅷ(FⅧ)为研究对象进行定点整合转染和表达分析.结果 通过定点整合转染建立了高表达的宿主细胞库；X-Fc融合蛋白和人FⅧ均在宿主细胞中获得了高表达,X-Fc融合蛋白的表达量为220 mg/L,人FⅧ在有血清培养条件下的酶活性为2 IU/ml,且细胞株表达稳定,易于扩大培养.结论 已成功建立了基于CHO细胞定点整合的重组复杂蛋白快速表达体系,该体系在克隆效率和时间上具有很大优势,可实现蛋白的有效快速表达.