流加培养重组大肠杆菌表达核糖核酸酶Ba

• 作者: 凌雪萍 卢英华 敬科举 束必烈 江腾 邹婷云
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: barnase kil-Km分泌盒 大肠杆菌JM109(DE3) 流加培养
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 88-92
• 分类号: Q939.97
• 字数: 2756字
• 语种: 中文

摘要

核糖核酸酶Ba(barnase)是一种产自解淀粉芽孢杆菌的胞外核糖核酸酶,具有强毒性,能降解RNA,在农业、医疗、制药等领域有广泛的应用前景.利用重组表达barnase的大肠杆菌为研究对象,以期使用kil基因改善分泌状况,并实现大肠杆菌的高密度培养以及蛋白的高产表达.通过把kil-Km分泌盒克隆入质粒载体pET-32a(+)-barnase-barstar使barnase更加容易分泌与纯化,并使用Riesenberg培养基对重组大肠杆菌发酵生产barnase的不同葡萄糖浓度底物反馈控制补料流加策略进行了研究.初步确定1.0g/L葡萄糖底物反馈流加时,获得的barnase酶活最高,为7.14 kU/mL,是文献报道的1.88倍,此时细胞干质量浓度为22.93g/L,其中细胞间质的酶活达到3.53 kU/mL.为今后的发酵barnase研究提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	敬科举	厦门大学化学化工学院	18	91	6.0	8.0
2	卢英华	厦门大学化学化工学院	73	723	13.0	23.0
6	凌雪萍	厦门大学化学化工学院	31	244	8.0	14.0
7	江腾	厦门大学化学化工学院	1	1	1.0	1.0
8	邹婷云	厦门大学化学化工学院	1	1	1.0	1.0
9	束必烈	厦门大学化学化工学院	1	1	1.0	1.0