RNA干扰趋化因子受体4基因表达对神经母细胞瘤体外侵袭能力的影响

• 作者: 董蒨 邢士超 郝希伟 陈鑫 鹿洪亭
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,趋化因子 RNA干扰 神经母细胞瘤
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 285-289
• 分类号: R73
• 字数: 5134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2011.04.013

摘要

目的 构建趋化因子受体4(CXCR4)小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,研究其对体外神经母细胞瘤侵袭能力的影响.方法 选择CXCR4高表达的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,设计合成人CXCR4基因不同靶点的能编码siRNA的3条双链DNA序列,克隆到真核表达载体pSilencerTMneo中构建siRNA表达载体,体外脂质体介导转染SH-SY5Y细胞,用半定量RT-PCR分析CXCR4基因mRNA的变化,用免疫组织化学和Western blot分析CXCR4蛋白表达,Transwell小室检测细胞的侵袭能力.结果 成功构建了CXCR4-siRNA表达载体,转染后半定量RT-PCR检测神经母细胞瘤细胞CXCR4 mRNA丰度分别为siR1转染组0.32±0.09、siR2转染组0.35±0.13和siR3转染组0.33±0.11,相对于对照组0.58±0.13表达下降(P＜0.05);转染后免疫组化检测神经母细胞瘤细胞CXCR4的蛋白表达分别为siR1转染组75.98±4.81、siR2转染组75.52±3.95和siR3转染组76.35±6.51,相对于对照组92.196±3.89表达下降(P＜0.01);转染后Western b1ot检测神经母细胞瘤细胞CXCR4的蛋白表达分别为siR1转染组0.1103±0.0023、siR2转染组0.1203±0.015和siR3转染组0.1308±0.0018,相对于对照组0.4832±0.0012表达下降(P＜0.01);且转染后神经母细胞瘤细胞侵袭能力较对照组53.11±3.72降低(P＜0.05),siR1转染组为25.48±2.81、siR2转染组为30.89±2.77、siR3转染组为18.83±1.79.结论 CXCR4-siRNA表达载体通过降低CXCR4基因的蛋白表达能显著抑制神经母细胞瘤细胞的体外侵袭能力,有望为神经母细胞瘤的基因治疗开辟新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董蒨	青岛大学医学院附属医院小儿外科	92	296	10.0	13.0
2	鹿洪亭	青岛大学医学院附属医院小儿外科	56	189	8.0	11.0
3	陈鑫	青岛大学医学院附属医院小儿外科	28	69	5.0	7.0
4	郝希伟	青岛大学医学院附属医院小儿外科	21	114	7.0	10.0
5	邢士超	青岛大学医学院附属医院中心实验室	12	38	3.0	6.0