三丁基过氧化氢诱导Sca-1+造血干/祖细胞衰老与P16INK4a表达的关系

• 作者: 周玥 姚欣 姜蓉 杨斌 王亚平
• 来源期刊: 解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 造血干/祖细胞 衰老 三丁基过氧化氢 P16INK4a
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 再生医学专题
• 页码范围: 172-175
• 分类号: R329.2
• 字数: 4008字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2011.02.009

摘要

目的:探讨三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导Sca-1+造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老与调控P16INK4a表达的关系,为寻找延缓HSC/HPC衰老方法提供理论和实验依据.方法:免疫磁性分选法分离纯化小鼠Sca-1+ HSC/HPC.用t-BHP诱导Sca-1+ HSC/HPC6h建立体外细胞衰老模型,通过衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、细胞周期测定和造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养观察t-BHP诱导Sca-1+ HSC/HPC衰老的生物学作用;逆转录聚合酶链反应检测衰老相关基因p16INK4a mRNA的表达;蛋白免疫印迹检测P16INK4a蛋白的表达.结果:免疫磁性分选法分离纯化的Sca-1+ HSC/HPC纯度可达87.33%±1.25%.衰老组细胞SA-β-Gal染色阳性率和G1期细胞比例高于对照组,生成CFU-Mix数低于对照组,衰老组P16INK4a mRNA及蛋白的表达水平较对照组上调.结论:t-BHP能有效诱导Sca-1+ HSC/HPC衰老,其机制可能与调节P16INK4a mRNA及蛋白的表达有关.