圆果种黄麻功能叶总蛋白提取方法及双向电泳体系的优化

• 作者: 徐建堂 李华丽 林培清 祁建民 郭英 陈富成 陈涛 陈美霞 陶爱芬
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 黄麻功能叶 提取方法 蛋白质双向电泳(2-DE) 优化上样量
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 369-373
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.00369

摘要

蛋白质提取方法和电泳条件是蛋白质组学研究中双向电泳的关键.本文初步建立起一套适合圆果种黄麻功能叶总蛋白双向电泳(2-DE)分析的高效提取方法及电泳条件,在双向电泳技术中,比较了TCA丙酮、Tris-base/丙酮、Tris-HCI的蛋白提取方法,并优化了上样量和样品制备方法.结果表明,TCA丙酮法提取蛋白质产量高,达79.0 mg91,比Tris-base/丙酮法和Tris-HCl的产量分别高出44.2%和114.1%.该法得到的2-DE图谱背景清晰,蛋白点数最多,约602个,较其他两种方法更适合用于黄麻功能叶总蛋白双向电泳分析;350ug为最佳上样量.这为黄麻蛋白质组学后续研究奠定了基础.