牛气管抗菌肽在毕赤酵母中的表达与鉴定

• 作者: 吴双 孙怀昌 左伟勇 朱善元 李哲峰 洪伟呜 王安平 王永娟 黄文强
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛气管抗菌肽 毕赤酵母 表达 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1316-1320
• 分类号: Q786
• 字数: 3803字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.06.026

摘要

为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽(bTAP)的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建表达载体pPIC9 K-b TAP.用Sal Ⅰ酶切线性化pPIC9 K-b TAP质粒后电转化毕赤酵母GS115,经G418筛选阳性克隆,并用甲醇诱导其表达.SDS-PAGE分析结果表明表达的重组蛋白质分子量正确,抑菌试验结果表明表达的重组蛋白质bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果.