Snai1 miRNA干扰质粒构建及胃癌细胞系稳定株筛选

• 作者: 沈永华 潘程宇 邹晓平 郭慧敏 陈敏 黄淑玲
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: Snai1 微小干扰核糖核酸
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 211-214
• 分类号: Q78|R735.2
• 语种: 中文

摘要

目的:设计并构建针对Snai1的微小干扰核糖核酸(miRNA),最终鉴定出有效干扰质粒并筛选稳定转染的胃癌细胞株SGrC-7901.方法:设计并构建4对Snai1的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR microRNA及1对无效对照microRNA干扰质粒.将干扰质粒用罗氏BD转染试剂转染胃癌细胞株SGC-7901,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光确定转染效率.分别用不同浓度1的杀稻瘟菌素作用于SGC-7901细胞,得到杀稻瘟菌素对SGC-7901细胞的筛选浓度.Western blot检测4对干扰质粒、阴性对照质粒对snai1蛋白水平表达的影响.结果:测序表明,Snai1 干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒瞬时转染的SGC-7901细胞系在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光达85%以上.杀稻瘟菌素对于SGC-7901细胞的筛选浓度为5μg/ml.Westernblot结果显示,干扰序列Mi-1对Snai1有较强的干扰效果.结论:成功构建了Snai1干扰真核表达载体,同时筛选出有效干扰质粒及稳定转染株,为进一步研究Snai1在胃癌中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹晓平	南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化内科	18	112	7.0	10.0
2	潘程宇	南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化内科	2	13	1.0	2.0
3	郭慧敏	南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化内科	3	15	2.0	3.0
4	陈敏	南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化内科	53	284	10.0	13.0
5	黄淑玲	南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化内科	1	1	1.0	1.0
6	沈永华	南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化内科	1	1	1.0	1.0