荧光假单胞菌7-14flhA基因的克隆与功能的初步分析

• 作者: 丁运昭 刘凤权 康越景 胡白石 范加勤 钱国良
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 荧光假单胞菌 flhA基因 鞭毛合成 游动性
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 282-287
• 分类号: S435.111.4+2
• 字数: 3077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.02.009

摘要

为了探索flhA基因在荧光假单胞菌7-14(Pf7-14)鞭毛合成的作用,以铜绿假单胞菌UCBPP-PA14的鞭毛蛋白FlhA(NC_008463.1)为诱饵,在荧光假单胞菌Pf-5(NC_004129)、Pf0-1(NC_007492)和SBW25(NC_012660)的伞基因组中进行BLASTP比对分析,结果在Pf-5、Pf0-1和SBW25的全基因组搜索到flhA的同系物,分别命名为flhAPf-5、flhAPf0-1,和flhASBW25.根据三者的核酸序列,设计简并引物flhA-F/flhA-R,以荧光假单胞菌7-14(Pf7-14)基凶组DNA为模板进行PCR扩增,并对得到的片段测序比对,发现该片段2 130 bp为一完整的开放阅读框,命名为flhAPf7-14.flhAPf7-14在氨基酸水平上与flhAPf-5和flhAPf0-1的同源性分别达到93%和94%.Southern杂交证明flhA 在Pf7-14基因组中为单一拷贝.通过同源重组单交换的方式构建了Pf7-14flhA基因插入失活突变株,结果表明flhA突变体缺失了鞭毛装置并丧失了游动性,而互补菌株则恢复了鞭毛合成能力和游动能力.本研究为今后进一步研究Pf7-14鞭毛合成、菌体游动性与该菌定殖能力及生防能力的关系奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡白石	南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室	52	883	18.0	28.0
2	丁运昭		5	8	2.0	2.0
3	范加勤	南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室	8	77	3.0	8.0
4	钱国良	南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室	14	240	6.0	14.0
5	康越景	南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室	1	0	0.0	0.0