黑胫病菌诱导的烟草SSH文库构建及其分析

• 作者: 刘贯山 周佳 孙玉合 李元元 杨帆 杨爱国 王元英 罗成刚 苏振刚 赵百英
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 烟草 黑胫病病菌 抑制差减杂交 反向Northern斑点杂交 非亲和互作
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·分子遗传学
• 页码范围: 1763-1770
• 分类号: S435.72
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.01763

摘要

黑胫病是危害严重的世界性烟草主要病害之一,探究烟草对黑胫病的抗病机制,可以为该病的综合防治提供理论依据.本研究以烟草黑胫病抗性品种革新3号为材料,利用黑胫病0号生理小种诱导其水平抗性,分别在接种后0.5、1、3、6、10和16 d取样,通过抑制差减杂交技术(SSH)构建cDNA文库,获得了960个阳性克隆.利用反向Northern斑点杂交技术对其中240个阳性克隆进行杂交筛选,筛选出57个表达差异明显的基因,序列拼接后获得33条高质量EST,测序及其比对分析表明,革新3号对烟草黑胫病抗性相关基因主要涉及抗病防卫、光合作用、信号传导和能量代谢等方面.进一步基因功能分析显示,病程相关PRlb蛋白、半胱氨酸蛋白、延伸因子1-a、α-微管蛋白、细胞色素P450、精胺合成酶、水通道蛋白、过氧化物酶体膜蛋白、甘氨酸延伸因子等可能参与了烟草与黑胫病菌非亲和互作过程.