巴夫杜氏藻1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因的克隆和分析

• 作者: 吕鹏梅 尚常花 朱顺妮 王忠铭 袁振宏
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 巴夫杜氏藻 基因克隆 5'-上游序列分析 rbcS 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 页码范围: 668-674
• 分类号: Q786|S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2011.17221

摘要

1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合作用中的一个关键酶,其小亚基rbcS具有调控羧化反应催化效率和影响该酶对二氧化碳/氧气底物特异性的功能.从巴夫杜氏藻中克隆rbcS基因及其5'-上游序列,并对基因及5'-上游序列进行了分析.根据已知rbcS基因保守核苷酸序列设计引物,分别克隆到1 841 bp的DNA和380 bp的cDNA序列.以此为基础,使用染色体步移(Genome walking)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术,获得了799 bp的5'端DNA序列和500 bp的3'端cDNA序列.序列分析发现,巴夫杜氏藻rbcS DNA全长为2 031bp(不包括476 bp 5'-上游序列),cDNA全长包括570bp开放读码框(GenBank登录号:HQ315783)和294 bp3'端非翻译区.5'-上游序列区域存在一系列预测的顺式作用元件.该研究旨在为后继的rbcS基因的功能和表达研究、Rubisco的遗传改造奠定基础.同时,rbcS启动子因其可驱动基因高效表达而引起广泛关注,因此获得的rbcS 5'-上游序列经验证和优化后,可用于在嗜盐微藻中驱动转基因的高效表达以及完善微藻转化系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕鹏梅	中国科学院广州能源研究所可再生能源与天然气水合物重点实验室	42	1209	20.0	34.0
2	袁振宏	中国科学院广州能源研究所可再生能源与天然气水合物重点实验室	109	1950	22.0	41.0
3	尚常花	中国科学院广州能源研究所可再生能源与天然气水合物重点实验室	9	21	2.0	4.0
4	朱顺妮	中国科学院广州能源研究所可再生能源与天然气水合物重点实验室	16	47	5.0	6.0
5	王忠铭	中国科学院广州能源研究所可再生能源与天然气水合物重点实验室	22	212	6.0	14.0