重组真核质粒pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)的构建及表达

• 作者: 朱梦瑜 杨洁 葛林 赵秀娟 赵虹 钱宝鑫 高星杰
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 绿色荧光蛋白质类 质粒 基因表达 印迹法,蛋白质 重组融合蛋白质类 限制性内切酶图谱法
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 990-992
• 分类号: R341
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2011.11.003

摘要

目的:将人类G3BP(Ras-GTPase activating protein SH3 domain binding protein)蛋白Domain (1～5)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使G3BP蛋白各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达.方法:以重组质粒pEGFP-C1-G3BP为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切法将目的片段连接到pEGFP-C2载体上,再将构建成功的pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)重组质粒转染入HeLa细胞内,以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的蛋白的融合表达情况.结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达.结论:重组pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)质粒成功构建并表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨洁	天津医科大学生化教研室	56	151	7.0	10.0
5	葛林	天津医科大学生化教研室	15	45	4.0	5.0
6	朱梦瑜	天津医科大学免疫教研室	13	39	4.0	5.0
7	高星杰	天津医科大学基础医学研究中心	18	24	3.0	3.0
8	赵秀娟	天津医科大学免疫教研室	13	62	5.0	7.0
9	钱宝鑫	天津医科大学免疫教研室	4	7	1.0	2.0
10	赵虹	天津医科大学免疫教研室	4	9	2.0	3.0