SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法检测猪细小病毒

• 作者: 刘业兵 姜晓晨 张志刚 张晓杰 陈坚
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 猪细小病毒 SYBR Green I实时定量PCR 检测
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 6-8
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2011.08.002

摘要

为建立特异敏感的猪细小病毒(PPV)的SYBR Green I实时定量PCR检测方法,本研究根据GenBank上PPV NS1保守序列设计合成了1对引物,利用本实验室构建的重组质粒(pMD18-T-PPV NS1)为标准模板,对反应条件进行优化,绘制标准曲线,并进行熔解曲线分析,建立了PPV的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法.分别进行了特异性、敏感性及重复性检验,结果表明,本方法具有良好的特异性,与PRRSV、CSFV、PRV、PCV-2、SIV及阴性对照均为阴性;其最低检出量为7copies/μL,比PCR敏感100倍,且批内和批间重复性良好.用该方法对15份临床病料进行检测,并与常规PCR、环介导等温扩增(LAMP)方法进行对比,显示该方法灵敏度高、成本低,能够对样品组织中病毒进行定量检测,为快速检测PPV提供了有效的技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘业兵		63	419	11.0	17.0
2	张晓杰		4	12	2.0	3.0
3	陈坚		6	37	4.0	6.0
7	姜晓晨		3	18	3.0	3.0
8	张志刚		3	22	3.0	3.0