猪繁殖与呼吸综合征病毒5’非编码区前导转录调控序列及其侧翼序列的结构与功能解析

• 作者: 刘萍 蔺涛 袁世山 陆嘉琦 高飞
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 5’非编码区 前导转录调控序列 病毒复制 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-6
• 分类号: S852.65
• 字数: 4694字
• 语种: 中文

摘要

为解析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)5’非翻译区(5'UTR)的高级结构与功能,以北美株PRRSV感染性克隆为平台,通过定点突变PCR技术将其5'UTR中一特殊高级调控元件的一级序列进行突变,以改变其二级茎环结构,从而解析该结构的基因调控水平.将突变DNA克隆转染入BHK-21细胞后利用免疫荧光及RT-PCR试验来研究拯救后突变病毒的转录、翻译特性,及通过空斑形态学及病毒生长曲线分析突变病毒的生长特性.结果表明,PRRSV 5'UTR中该高级调控元件的顶端环结构为病毒复制所必需,其只可耐受2个核苷酸的突变；同时发现该调控元件中一保守的茎结构为病毒复制非必需.由此证实了PRRSV 5 'UTR中调控病毒复制过程的必需高级结构,为进一步解析PRRSV复制调控元件奠定基础.