b型流感嗜血杆菌多糖ELISA检测方法的建立

• 作者: 沈坚 王维 瞿爱东 祝婧烨 秦洁 马相虎
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜血菌,流感,b型 多糖 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1360-1362
• 分类号: R378.4+1|R392-11
• 语种: 中文

摘要

目的 建立b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多糖(Polyribosylribitolphosphate,PRP)的ELISA检测方法.方法 用灭活的Hib菌免疫家兔,1周免疫4次,共免疫6周,采血,检测血清抗体滴度.对兔免疫血清进行非特异性抗体免疫吸附,纯化兔抗PRP抗体,用纯化的兔抗PRP抗体包被酶标板,HRP标记的羊抗兔IgG作为二抗,建立双抗体夹心ELISA法检测PRP.确定标准曲线的最佳线性范围,并对方法进行特异性、准确性和精密性验证.结果 兔免疫血清的抗体效价可达1∶2 800.该方法的线性检测范围为0.030～0.500 ng/ ml,检测限为0.030 ng/ml.该方法检测大肠杆菌上清蛋白、牛血清白蛋白、LB培养基及破伤风-乙脑结合疫苗均无特异性反应；检测0.500、0.250、0.150 ng/ml的PRP标准品试验内变异系数(CV)在1.16％～2.40％之间,回收率在93.2％～107.2％之间；试验间CV在1.57％～4.11％之间,回收率在101.3％～101.6％之间.结论 该方法特异性、准确性和精密性均较好,可以特异性检测b型流感嗜血杆菌多糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	瞿爱东		25	25	2.0	3.0
2	秦洁		17	70	5.0	7.0
3	沈坚		10	9	2.0	2.0
4	马相虎		25	37	3.0	4.0
5	祝婧烨		2	1	1.0	1.0
6	王维		1	1	1.0	1.0