以流式核型分析小麦根尖细胞的有丝分裂同步化过程

• 作者: 张仁和 徐兆师 李春莲 李连成 郭东伟 闵东红 陈明 陈耀锋 马有志
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 小麦 有丝分裂 同步化 流式核型 分选
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·分子遗传学
• 页码范围: 1794-1800
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.01794

摘要

构建染色体特异文库是简化小麦基因组测序的有效途径,而通过同步化处理提高根尖细胞有丝分裂指数,使根尖细胞中富集高比例的中期染色体是实现染色体分选成功的前提.采用双阻断法用50 μmol L-1羟基脲和100μmol L-1氟乐灵对普通小麦根尖细胞进行同步化处理,然后用流式核型分析法观测各周期细胞在不同时间点上的比例变化.结果显示,最佳方案为羟基脲处理lOh,恢复7h,氟乐灵处理4h.以此方案处理中国春小麦根尖可获得最高的有丝分裂指数,达70.1％.附加冰水处理(0℃)有助于减少染色体碎片和增加流式核型的分辨率,但对富集更多的中期染色体没有效果.