重组结核分枝杆菌PPE65蛋白的制备及其在肺结核诊断中的价值

• 作者: 何秀云 庄玉辉 葛林虎 赵雅贞 郝娟 马龙凤 黄香玉
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核,肺 抗原,细菌 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 分子诊断
• 页码范围: 633-637
• 分类号: R392-33
• 字数: 4160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2011.07.013

摘要

目的 评价重组PPE65蛋白IgG抗体用于检测肺结核患者的价值.方法 将编码结核分枝杆菌PPE65蛋白的基因克隆到PET-28a载体,并在大肠埃希菌中表达,镍亲和层析和离子层析法纯化重组PPE65蛋白,透析复性和Lowry法测蛋白浓度.采用ELISA法检测144例肺结核患者、144名健康者、56例非结核肺部疾病患者血清中抗重组PPE65蛋白和重组PstS1蛋白的IgG抗体水平.用ELISA检测144例肺结核患者和97名PPD皮试阴性健康人血清IgG结果绘制ROC曲线确定临界值.分析评价重组PPE65蛋白及其与重组PstS1蛋白联合检测肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性.结果 结核分枝杆菌PPE65蛋白在大肠埃希菌中获得表达,层析纯化获得纯度为95%的重组PPE65蛋白,复性后蛋白浓度为0.5 mg/ml.重组PPE65蛋白IgG抗体的ELISA检测临界值为0.64.重组PPE65蛋白诊断肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性分别为34.7%(50/144)、93.5%(187/200)、79.4%(50/63)、66.5%(187/281)、68.9%(237/344);重组PPE65蛋白和重组PstS1蛋白联合诊断肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性分别为59.0%(85/144)、91.0%(182/200)、82.5%(85/103)、75.5%(182/241)、77.6%(267/344).结论 结核分枝杆菌PPE65蛋白可作为结核患者血清检测的蛋白抗原之一.PPE65蛋白和重组PstS1蛋白IgG抗体联合检测用于结核病诊断可提高敏感度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何秀云	解放军第三○九医院中心实验室	20	120	6.0	10.0
2	庄玉辉	解放军第三○九医院中心实验室	21	292	8.0	17.0
3	郝娟	解放军第三○九医院中心实验室	3	5	1.0	2.0
4	黄香玉	解放军第三○九医院中心实验室	5	14	3.0	3.0
5	赵雅贞	解放军第三○九医院中心实验室	3	5	1.0	2.0
6	马龙凤	沈阳市胸科医院检验科	2	7	2.0	2.0
7	葛林虎	解放军第三○九医院中心实验室	1	5	1.0	1.0