副猪嗜血杆菌菌影的制备

• 作者: 于申业 刘思国 刘慧芳 司薇 常月红 张艳禾 沈楠 王春来 胡明明 谢芳
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 菌影 裂解基因
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 11-14
• 分类号: S852.61
• 字数: 2512字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.01.03

摘要

为研制副猪嗜血杆菌(H.parasuis)菌影疫苗,本实验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将其连接到含有λPI/PR-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,使裂解基因E与λPI/PR-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV-E.并将含有E基因的裂解盒插入pMD18-T载体中,构建 H.parasuis打孔质粒(pMD-E).采用电击穿孔法将其转入E.coli β2155中,利用接合的方式将打孔质粒转入H.parasuis 5型菌株中.将含有打孔质粒的H.parasuis在28℃培养至对数生长期,升温到42℃诱导E基因表达,制备H.parasuis菌影.电镜观察菌影形态完整,内容物全部被释放到胞外.本实验为进一步研究菌影疫苗奠定了基础.