穴蚁蛉幼虫全长均一化cDNA文库的构建

• 作者: 李广宏 杨展 王欢歌 苏志坚 邱壮伟 黄亚东
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 穴蚁蛉 蚁狮 全长cDNA 文库 均一化 EST分析
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 102-107
• 分类号: S899.9
• 字数: 4927字
• 语种: 中文

摘要

通过构建穴蚁蛉幼虫(俗称蚁狮)全长均一化cDNA文库,以期了解蚁狮的抗菌肽、毒素蛋白以及其它药用蛋白种类,为日后筛选、克隆表达和分离纯化这些药用蛋白奠定基础.用针刺诱导蚁狮产生抗茵物质后,分离纯化总RNA,结合SMART全长文库与DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建全长均一化cDNA文库,并通过平板计数和菌落PCR方法鉴定文库.随机挑选192个单克隆进行5′端测序,并与NCBI数据库进行比对分析.结果显示,构建出的文库平均插入片段长度为1 200bp,原始文库的滴度达到7.5×105 CFU/mL,而扩增文库则为1.95×1011CFU/mL.在所挑选的单克隆中,共获得190条有效序列,平均读长1 340 bp,文库重组率达到98.96%.与NCBI数据库比对后发现,这些序列可能是一些编码蚁狮免疫、消化及毒性蛋白的基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏志坚	暨南大学生命科学学院医药生物技术研究开发中心	51	273	8.0	14.0
5	邱壮伟	暨南大学生命科学学院医药生物技术研究开发中心	2	4	1.0	2.0
6	杨展	暨南大学生命科学学院医药生物技术研究开发中心	1	3	1.0	1.0
7	李广宏		2	15	2.0	2.0
8	王欢歌	暨南大学生命科学学院医药生物技术研究开发中心	1	3	1.0	1.0