乙型脑炎病毒NS5蛋白原核表达与亚细胞定位研究

• 作者: 吴光旭 曹胜波 栗永茂 熊涛 陈龙 霍雨艳
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: NS5 原核表达 亚细胞定位 乙型脑炎病毒
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 778-782
• 分类号: R373.3
• 字数: 4119字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.09.003

摘要

目的 对乙型脑炎病毒NS5蛋白进行原核表达和亚细胞定位研究.方法 通过PCR扩增乙型脑炎病毒NS5基因,并将之克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建的重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞,经IPTG诱导表达目的蛋白.将表达产物纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备NS5蛋白特异性的多克隆抗体.同时,构建NS5基因与绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的真核表达质粒pcDNA-NS5-EGFP,将之转染BHK-21细胞,利用激光共聚焦荧光显微镜观察NS5蛋白在BHK-21细胞中的亚细胞定位.结果 NS5蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达蛋白分子量大小约为103kD,该蛋白在真核细胞中的表达呈颗粒状不均匀分布于整个细胞,且颗粒状主要分布在细胞质中.结论 成功表达乙型脑炎病毒NS5蛋白,并对NS5蛋白的亚细胞定位进行了分析,为进一步研究NS5蛋白提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹胜波	华中农业大学动物科技学院动物医学院	36	641	13.0	25.0
2	吴光旭	长江大学生命科学学院	45	435	12.0	19.0
3	熊涛	长江大学生命科学学院	29	115	7.0	9.0
4	陈龙	华中农业大学动物科技学院动物医学院	6	84	2.0	6.0
5	栗永茂	长江大学生命科学学院	3	14	2.0	3.0
6	霍雨艳	长江大学生命科学学院	3	11	2.0	3.0