"核转染"技术对树突状细胞功能的影响

• 作者: 于文文 于津浦 任秀宝 刘亮 张家丽 张晶 李慧 李润美 赵华 霍佳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 转染 质粒
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 735-738
• 分类号: R392-33
• 字数: 4228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.08.013

摘要

目的:研究"核转染"方法对DC活率、细胞表面分子及细胞因子分泌水平的影响.方法:体外诱导单核细胞分化为DC后,通过"核转染"方法将p/IRES-EGFP质粒转染至细胞核内,同时设立未转染DC为对照组.应用台盼蓝染色计算转染后细胞的活率;荧光显微镜下观察转染效率;流式细胞术检测细胞表面分子CD80、CD83、CD86、HLA-DR及CD11c等的表达;ELISA法检测DC培养上清IL-12及TNF-α的分泌水平.结果:DC转染后随时间推移,细胞活率下降;荧光蛋白在转染后4小时即有表达,表达量逐渐增加,24小时转染效率为56%±12%,48小时转染效率为45%±15%;转染后细胞表面分子CD80、CD83及CD86表达随时间推移逐渐降低,CD11c及HLA-DR表达水平稳定;转染可诱导DC分泌IL-12及TNF-α水平增加.结论:"核转染"是一种有效的转染DC的方法,并可诱导DC分泌多种细胞因子.