乳酸菌中幽门螺杆菌ureB基因的食品级表达与优化

• 作者: 张荣光 段广才 范清堂 陈帅印
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 ureB基因 乳酸乳球菌 食品级表达载体 条件优化
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 396-398
• 分类号: R183
• 字数: 2457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2011.03.023

摘要

目的:以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)为宿主菌构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)尿素酶B(UreB)的食品级表达系统.方法:从重组质粒pMD19-T-ureB上酶切得到ureB基因片段,与含有筛选标记lacF基因的L.lactis表达载体pNZ8149经双酶切后定向连接,应用PCR、酶切和测序的方法鉴定重组子.重组菌用乳联菌肽诱导表达,用正交表实验进行表达条件的优化,通过SDS-PAGE和Western blot对重组蛋白进行鉴定.结果:重组菌Nz3900/pNz8149-ureB经鉴定与预期相符.优化结果显示在菌体培养到D600nm为0.40左右时加入终浓度为25μg/L的乳联菌肽诱导5 h产量最高,通过Western blot能检测到UreB的表达.结论:构建了ureB基因食品级表达系统,并得到了表达的最优条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张荣光	郑州大学基础医学院寄生虫学教研室	35	99	6.0	8.0