陆地棉耐盐相关基因GhSAMS的克隆及表达

• 作者: 叶武威 周凯 宋丽艳 樊保香 王俊娟 王德龙
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 陆地棉 盐胁迫 S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 1012-1019
• 分类号: S562
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.01012

摘要

为了挖掘棉花耐盐相关基因,根据陆地棉耐盐性抑制消减文库中的一个S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的同源EST设计引物,利用RACE结合RT-PCR技术克隆陆地棉S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的cDNA全长,命名为GhSAMS.该cDNA全长1 576 bp,ORF为1 182 bp,编码393个氨基酸的多肽.生物信息学分析表明GhSAMS蛋白与拟南芥、盐地碱蓬、水稻中该蛋白的相似性分别为91%、93%和93%.系统发育树结果显示GhSAMS与盐地碱蓬中该蛋白的亲缘关系最近.Real-time PCR分析结果表明,GhSAMS的表达受盐胁迫诱导,在盐敏感材料中诱导被推迟,而且,该基因表达水平在耐盐材料中9835中明显高于在盐敏感材料中S9612中.构建了原核表达载体pET28-GhSAMS,经IPTG诱导,实现了GhSAMS在大肠杆菌中的表达,为进一步开展GhSAMS的遗传转化工作奠定了有益基础.