棉花P-typeATPases基因的克隆及表达分析

• 作者: 何冰 刘蔼民 张保龙 杨郁文 袁洪波 连梓伊 陈天子 陈菲
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉花 P-type ATPases基因 基因表达 克隆
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 1192-1197
• 分类号: Q78
• 字数: 3930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.06.005

摘要

为了探明棉花P-type ATPases基因在植物不同组织和多种逆境条件下的表达情况,利用棉花黄萎病菌的P-type ATPases蛋白序列,在GenBank中搜索棉花EST序列,得到2个同源的棉花EST片段,结合RACE和Genome walking获得了这个基因的完整读码框序列,其开放阅读框长度为3570bp,编码1190个氨基酸,与毛果杨、蓖麻的同源性达86％左右,将其命名为Gbpatp.洋葱表皮亚细胞定位观察结果显示,Gbpatp编码的蛋白分布在细胞膜上.RT-PCR技术检测组织表达特异性分析表明,P-type ATPases在茎和棉絮中的表达量较高,在种子中低水平表达,在叶片和花蕾中表达量极低,说明Gbpatp可能与棉花较成熟的器官茎、棉絮和种子的生长发育密切相关.在逆境胁迫中发现,干旱处理后Gbpatp的表达强烈,并且随处理时间延长表达量逐渐增加；重金属Cu2+处理24h后Gbpatp表达量升高,但48h急剧下降；Gbpatp在低温处理下也有轻微表达.激素诱导后发现,Gbpatp对赤霉素和脱落酸均有响应,随胁迫时间延长其表达量仍能维持在一定水平.