牛支原体、无乳支原体和丝状支原体丝状亚种小克隆三重PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 冉智光 张彦明 李大伟 熊仲良 范伟兴 谢建华 黄灿平
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛支原体 丝状支原体丝状亚种小克隆 无乳支原体 三重PCR
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 306-310
• 分类号: S852.62
• 字数: 3126字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在建立一种可一次性区分牛支原体、丝状支原体丝状亚种小克隆和无乳支原体的三重PCR诊断方法,为临床诊断和流行病学调查提供可靠检测技术.根据GenBank发表的上述3种病原的基因组序列保守区域设计3对特异性引物建立三重PCR方法;确定其检测敏感性,以猪支原体、鸡支原体、无乳支原体和丝状支原体丝状亚种小克隆基因作模板检验其特异性;同时和病原分离鉴定结果对比其准确性.结果表明在优化体系和条件下能够同时得到扩增长度为448、549、375 bp 3条特异性片段,未扩增出猪、鸡支原体模板特异性片段;其敏感性(可检测到的最小模板DNA含量)为0.8 ng·μL-1;36份临床样品检测结果显示,三重PCR检测结果与分离培养鉴定方法一致,均能鉴定出牛支原体阳性病料.本研究建立的三重PCR诊断方法能够一次性鉴别3种支原体,具有高敏感性、特异性和准确性,可用于临床诊断和流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冉智光		20	107	6.0	10.0
2	熊仲良		45	194	8.0	12.0
3	范伟兴		54	531	12.0	21.0
4	张彦明		3	66	3.0	3.0
5	谢建华		11	78	4.0	8.0
6	李大伟		2	57	2.0	2.0
7	黄灿平		2	57	2.0	2.0