结核患者血清IgG抗体适体的制备及特异性鉴定

• 作者: 刘忠华 杨华 柏文娟 秦莲花 胡忠义
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核病 IgG抗体 SELEX 适体
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1111-1114,1118
• 分类号: R392.11|R378.91
• 字数: 3088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.12.011

摘要

目的 筛选获得结核患者血清IgG抗体的特异性适体.方法 纯化结核患者血清中的IgG抗体,以IgG抗体为靶标,利用SELEX技术进行筛选,筛选得到的ssDNA适体文库,进行克隆测序、亲和性检测、二级构象分析,并用于血清标本检测,进行适体特异性的鉴定.结果 纯化获得了IgG抗体,浓度为1.3 mg/mL.SELEX筛选10轮后,随机挑选12个适体进行亲和性检测和二级结构分析.结果显示,亲和性吸光度值大于1.0的适体有4个.二级构象分析揭示,适体与靶分子的结合基础为口袋颈环鼓包结构和分枝的连接角度.对亲和性吸光度值大于1.0的4个适体,经29份临床标本检测进行特异性的进一步验证显示,其中有3个适体对结核病组与健康对照组的检测结果具有显著差异.结论 初步筛选获得结核患者血清IgG抗体的适体,并有较高的特异性.