58型人乳头瘤病毒L2蛋白的原核表达、纯化及单克隆抗体的制备

• 作者: 刘芳 吕琦 林洁 童亮 马岚
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 58型人乳头瘤病毒 L2蛋白 原核细胞 基因表达 蛋白质复性 抗体,单克隆
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 398-403
• 分类号: R373.9|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达并纯化我国高发的致宫颈癌58型人乳头瘤病毒(Human papillomavims,HPV)次要衣壳蛋白L2,并制备其单克隆抗体.方法 从含有HPV-58基因组的质粒pHPV58中扩增L2基因,插入改构的原核表达载体pGEX-KGV中,转化大肠杆菌BL21(DE3),乳糖诱导表达,透析复性并亲和层析纯化重组蛋白,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并对其进行鉴定.结果 重组表达质粒pGEX-KGV-HPV58 L2经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,表达量可占菌体总蛋白的15.5%;纯化的重组蛋白纯度可达95%;共获得10株抗HPV-58 L2的高效价单克隆抗体.结论 已成功原核表达、纯化了HPV-58 L2重组蛋白,并制备了单克隆抗体,为下一步HPV-58 L2蛋白抗原表位的研究以及相关预防性抗体药物和广谱重组疫苗的开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘芳	云南大学生命科学学院单克隆抗体工程技术中心	13	25	3.0	4.0
2	吕琦	云南大学生命科学学院单克隆抗体工程技术中心	10	40	3.0	6.0
3	林洁	清华大学深圳研究生院生命学部	3	11	2.0	3.0
7	童亮	云南大学生命科学学院单克隆抗体工程技术中心	2	1	1.0	1.0
8	马岚	清华大学深圳研究生院生命学部	8	23	3.0	4.0