新型鹅黄病毒JS804毒株的分离与鉴定

• 作者: 何孔旺 侯继波 刘宇卓 吴东明 张康宁 张敬峰 朱江宁 李彬 李银 温立斌 王永山 赵冬敏 邵国青 钮慧敏 高磊 黄欣梅
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅 非序列依赖性单引物扩增法 黄病毒 JS804毒株
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 354-360
• 分类号: S858.33
• 字数: 5229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.02.021

摘要

2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病.对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子.对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验.在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理(DNase-sequence independent single primer amplificmion,DNase-SISPA)对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增.剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死.含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示:病毒粒子直径为50～60 nm.动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒.应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属(Flavivirus)坦布苏病毒(Tembusu virus)基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%.据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%.将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010(简称JS804).研究结果表明:此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒.