结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B、Hsp16.3和ESAT6在血清学检测中的初步应用

• 作者: 师长宏 张彩勤 张海 杨巍 毛峰峰 白冰 赵勇 赵善民
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Ag85B Hsp16.3 ESAT6 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 401-404
• 分类号: R378.911|Q93.331|Q75
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨结核分枝杆茵分泌蛋白Hsp16.3、Ag85B以及融合蛋白ESAT6-CFP10、Ag85B-Hsp16.3和Ag85B-ESAT6用于TB病人血清学检测的意义.方法:将已构建的含5种目的基因的表达载体(pProEXHTb-Hsp16.3、pProEXHTa-Ag85B、pProEXHTbESAT6-CFP10、pProEXHTa-Ag85B-Hsp16.3、pProEXHTa-Ag85B-ESAT6),分别转入宿主茵E.coli DH5α中,诱导表达后分别获得Hsp16.3、Ag85B、ESAT6-CFP10、Ag85B-Hsp16.3和Ag85B-ESAT6五种蛋白,采用Ni2+亲和层析柱进行纯化,并用透析方法进行目的蛋白的复性.将经过复性的5种蛋白分别作为抗原,采用间接ELISA方法检测待测的血清样本,经OPD显色,测定各孔OD490值并判定结果.结果:五种蛋白被成功纯化并复性,通过ELISA方法共检测了22例TB病人血清、10例非结核病人血清和6例正常对照血清,Hsp16.3、Ag85B、ESAT6-CFP10、Ag85B-Hsp16.3和Ag85B-ESAT6这5种抗原的灵敏度分别为36.4%、90.9%、77.3%、95.5%、100%,特异性分别为100%、75%、100%、93.8%、93.8%.统计分析显示,ESAT6-CFP10和Ag85B、Ag85B-Hsp16.3、Ag85B-ESAT6这三种蛋白ELISA检测的结果无差异,而与Hsp16.3和痰涂片检测结果有显著差异.结论:Ag85B-Hsp16.3和Ag85B-ESAT6可作为结核分枝杆菌ELISA检测的初选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海	第四军医大学实验动物中心	87	511	12.0	18.0
2	赵勇	第四军医大学实验动物中心	74	352	10.0	14.0
3	白冰	第四军医大学实验动物中心	35	127	6.0	9.0
4	毛峰峰	第四军医大学实验动物中心	27	140	7.0	11.0
5	张彩勤	第四军医大学实验动物中心	42	102	5.0	7.0
6	赵善民	第四军医大学实验动物中心	15	30	2.0	4.0
7	杨巍	第四军医大学实验动物中心	3	10	2.0	3.0