环介导等温扩增法鉴定检测冬虫夏草

• 作者: 刘志国 李奎 李琦 袁媛 陈江源 黄璐琦
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 冬虫夏草 环介导等温扩增 鉴定 检测 检出限
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1605-1608
• 分类号: R282.5
• 语种: 中文

摘要

目的 建立冬虫夏草的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,实现对冬虫夏草的快速检测.方法 针对冬虫夏草的CS2 serine protease(csp2)基因设计LAMP内外引物对:利用CTAB法提取冬虫夏草DNA;优化扩增反应条件;采用包括冬虫夏草在内的6种不同虫草进行LAMP扩增,并对阳性产物酶切鉴定以检测其特异性,通过对模板DNA的10倍梯度稀释检测其灵敏度;紫外灯下观察凝胶电泳或加入荧光染料SYBR Green Ⅰ的扩增产物.结果 设计的LAMP引物可以特异地针对冬虫夏草的csp2基因进行LAMP扩增,产物可被限制性内切酶Taq1酶切,且有较高的灵敏度,检出限达6 pg/mL.结论 LAMP法可以实现对冬虫夏草的快速鉴定检测,在中药鉴定中有着广阔的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李琦	武汉工业学院生物与制药工程学院	10	105	7.0	10.0
2	李奎	武汉工业学院生物与制药工程学院	3	29	3.0	3.0
3	刘志国	武汉工业学院生物与制药工程学院	58	514	12.0	20.0
4	袁媛	中国中医科学院中药研究所	87	672	15.0	21.0
5	黄璐琦	中国中医科学院中药研究所	500	10193	46.0	73.0
6	陈江源	武汉工业学院生物与制药工程学院	4	47	4.0	4.0