家蚕核型多角体病毒BmNPV囊膜蛋白P74膜外区克隆和原核表达

• 作者: 唐琦 李国辉 胡朝阳 陈慧卿
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕核型多角体病毒 p74基因 P74蛋白 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 135-138
• 分类号: Q78
• 字数: 3234字
• 语种: 中文

摘要

通过PCR扩增家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)囊膜蛋白p74基因膜外区片段,对切胶纯化得到的DNA目的片段与原核表达载体pET28a进行连接,通过不同浓度的IPTG对含有pET28a-p74重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE电泳.结果表明p74基因膜外区获得了表达；通过His单抗对原核表达产物进行Western blotting分析,其结果证实诱导蛋白带为融合有组氧酸的目的蛋白.对割胶获得的P74蛋白和免疫佐剂进行克分研磨,以研磨后的匀浆液对昆明小鼠进行皮下多点注射,通过收获的抗血清对BmNPV ODV病毒粒子进行Westem blotting分析,检测到一条分子量大小为74 kD的特异杂交带,表明获得的多抗可用于P74蛋白功能的进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李国辉	江苏大学生命科学研究院	26	69	5.0	6.0
2	唐琦	江苏大学生命科学研究院	10	18	3.0	4.0
3	胡朝阳	江苏大学生命科学研究院	23	38	3.0	4.0
4	陈慧卿	江苏大学生命科学研究院	13	83	5.0	8.0