毛细管电泳法检测癌基因C-myc胃癌中基因点突变

• 作者: 张爱梅 徐娟 王先华 王晓莉 王荣 谢华 谢希晖 贾正平
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 胃癌 C-myc 突变 毛细管电泳 单链构象多态性 限制性片段长度多态性
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1695-1700
• 分类号: R735.2|O657.8
• 字数: 4712字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1096.2011.01695

摘要

癌基因C-myc激活和突变在胃癌形成过程中起着重要作用.通过毛细管电泳(CE)方法检测50例胃癌患者中C-myc基因突变,建立一种准确、快速诊断早期胃癌的方法.本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中C-myc基因第二外显子易发突变的部位基因序列,扩增样品分别经96℃变性和EcoRV酶切处理,以PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP分别对其突变情况进行检测.优化的CE检测条件:筛分介质PEO浓度3.0％,pH 8.2,电压15 kV,温度15℃；荧光检测:λex=488 nm,λem=520 nm.检测结果:C-myc基因总突变率为20.0％ (10/50).测序分析结果显示C-myc基因第二外显子第53密码子存在点突变,碱基A变为碱基T(GAT→GTT),碱基的改变使氨基酸由亮氨酸替代为谷氨酰胺.本研究数据证实C-myc基因突变与胃癌的形成紧密相关,CE检测C-myc突变基因可作为胃癌早期诊断的简便可靠的方法.