重金属锌单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 李霞 李鹏 杨慧 王凤龙 赵丽
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重金属 锌 螯合抗原 单克隆抗体 间接酶联免疫吸附法
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 214-220
• 分类号: Q503
• 字数: 5579字
• 语种: 中文

摘要

通过双功能螯合剂S-20-(4-异硫氰苄基)-二乙烯三胺五乙酸(p-SCN-Bn-DTPA)将锌离子(Zn2+)分别与载体蛋白匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联.通过二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)法测抗原蛋白浓度,对抗原、KLH和BSA分别进行紫外分光光度计扫描,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)进行定性鉴定,利用石墨炉原子吸收分光光度法检测抗原中Zn2+含量等,成功获得了免疫抗原Zn-DTPA-KLH和检测抗原Zn-DTPA-BSA、DTPA-BSA.用Zn-DTPA-KLH免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合,极限稀释法亚克隆,间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)筛选,获得了1株稳定分泌抗重金属锌抗体的杂交瘤细胞株(Z1A5).Z1A5染色体数目在100以上,所分泌的抗体为IgM亚类,轻链为kappa型,腹水型抗体效价高达1∶51 200.本研究为锌离子残留免疫学检测方法的建立提供了物质及技术基础,对提高风险评估工作的效率和质量,保障食品安全有重要现实意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王凤龙	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	55	189	7.0	10.0
2	李鹏	北京市农林科学院蔬菜研究中心	22	273	9.0	16.0
3	杨慧	北京市农林科学院蔬菜研究中心	9	145	6.0	9.0
4	赵丽	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	4	27	3.0	4.0
8	李霞	北京市农林科学院蔬菜研究中心	9	56	5.0	7.0