实时荧光定量PCR技术的操作实践

• 作者: 孙晓娜 曾毅 李泽琳 杨怡姝 沈思嗣 王小利
• 来源期刊: 实验室研究与探索
• 学科: 教育
• 关键词: 荧光定量PCR SYBR(R) Green I 扩增曲线 熔解曲线
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 15-19
• 分类号: G633.91
• 字数: 5541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7167.2011.07.004

摘要

采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBR(R) Green I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验.介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程；结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析；强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾毅	北京工业大学生命科学与生物工程学院	87	421	11.0	18.0
2	孙晓娜	北京工业大学生命科学与生物工程学院	15	180	7.0	13.0
3	沈思嗣	北京工业大学生命科学与生物工程学院	19	150	4.0	12.0
4	李泽琳	北京工业大学生命科学与生物工程学院	50	255	8.0	15.0
5	杨怡姝	北京工业大学生命科学与生物工程学院	39	213	6.0	14.0
6	王小利	北京工业大学生命科学与生物工程学院	28	212	6.0	14.0